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COLO 201人結(jié)直腸腺癌傳代細胞
細胞代號： | COLO 201 | ||||||||||||||||||
細胞名稱： | COLO 201人結(jié)直腸腺癌傳代細胞 | ||||||||||||||||||
組織來源： |
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對應(yīng)疾病： |
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生長特性： |
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細胞來源： | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進 | ||||||||||||||||||
培養(yǎng)條件： | 培養(yǎng)基： DMEM +10%FBS 氣相：空氣95%，二氧化碳5% 溫度：37℃ | ||||||||||||||||||
培養(yǎng)： | 一、貼壁細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代； 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進行傳代，*次傳代比例為1:2。 3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶，置于37°孵育消化（*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為消化時間，記錄消化時間，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后收集細胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細胞，進行傳代。
二、懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，然后置于無菌操作臺，打開瓶口，輕輕吹打后，將其中的細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清； 2.將離心好的細胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）； 3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時，對其進行傳代，*次傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。
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細胞總數(shù)： | 1~3*106 | ||||||||||||||||||
傳代周期： | 2-3天 | ||||||||||||||||||
傳代比例： | 1:2~1:4 | ||||||||||||||||||
換液頻率： | 2-3天 | ||||||||||||||||||
凍存液： | 90%FBS+10%DMSO | ||||||||||||||||||
注意事項：
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用，請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細胞，若大部分細胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細胞重新貼壁，表明細胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細胞可以去掉；若大部分細胞仍然不貼壁，將漂浮的細胞離心收集，用臺盼藍染色鑒定細胞活力，并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片，記錄細胞狀態(tài)，如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于一周內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問題，超過時間我段，本公司則默認細胞狀態(tài)良好，不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。
5 因細胞產(chǎn)品的特殊性，如客戶對本公司細胞質(zhì)量存有疑問，請于收到細胞后1月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，超過時間段，本公司則默認細胞質(zhì)量優(yōu)良，不承擔因細胞產(chǎn)生的任何責任。
Noverse細胞庫建立有標準化GMP細胞培養(yǎng)車間，保藏細胞種類2000余，從來源、引進、培養(yǎng)、凍存、復蘇、運輸，注重每一個環(huán)節(jié)，提供活力強，代數(shù)靠前，優(yōu)質(zhì)細胞株細胞系。
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